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中药黄芩提取黄芩苷的工艺方法

       黄芩苷分子式为C21H18O11,是一种黄酮类化合物,其水溶性极小,具有一定的脂溶性。《中国药典》2015版规定黄芩中成分黄芩苷的含量不得少于9.0%,由此可见提取分离黄芩苷纯品成本高,不便于大生产用药,不能满足制剂要求。然而,由于黄芩苷具有较高的开发前景,因此对提取和纯化黄芩苷的方法进行研究非常有现实意义。
       目前已报道的黄芩苷提取纯化方法很多,有水提取酸沉淀法、超声法、超滤法、醇提取酸沉淀法、微波提取法等,而常用的为水提取酸沉淀法。
水提酸沉法
       1、液-液双向萃取 精密称取黄芩药材粉末约5g,以煮沸的pH=2的磷酸缓冲液30mL烫过,冷却至38℃左右接入液-液双向萃取仪中。从回流管上端以漏斗加入乙酸乙酯至b瓶的1/3处,a瓶浸入38℃左右的油浴中,b瓶进行加热搅拌,使乙酸乙酯形成回流。回流提取四小时后收集乙酸乙酯液,于旋转蒸发仪上回收乙酸乙酯,得药材提取物备用。

       2、普通方法提取 精密称取黄芩药材粉末约5g,提取三次,第一次以10倍量沸水烫过煎煮2小时,第二、三次分别加8倍量水进行煎煮、每次1小时,合并煎液,滤过,滤液加2mol/L盐酸(80℃)调节pH值至2保温1小时,静置24小时,滤取沉淀,用水洗至pH5.0,继用70%乙醇洗涤至pH7.0,低温干燥,即得。

       3、样品测定 样品提取物中加入少量70%乙醇微热使溶解,转入100 mL容量瓶中,超声溶解30min,以70%乙醇定容,滤过,弃去初滤液,精密吸取5.0mL续滤液以70%乙醇定容于50 mL量瓶中,精密吸取1.0 mL置于25mL容量瓶中,加入20mL0.2mol/L盐酸,再加70%乙醇至刻度,摇匀。于276nm波长处测定吸光度。
黄芩苷传统提取方法
       将黄芩药材切片加水煎煮3次,合并提取液,过滤,滤液浓缩并在80℃加盐酸调节pH值至1.0~2.0,保温1h,静置12h,过滤,沉淀加入6~8倍水,用NaOH溶液调pH值至7.0,再加等量乙醇溶解,过滤,滤液加盐酸调pH值至2.0,60℃保温30分钟,静置12h,过滤,沉淀加乙醇洗至pH值为7.0,挥尽乙醇即得黄芩苷粗品。该工艺的缺点在于操作繁琐、生产周期长、提取率低、盐酸的使用不仅存在安全隐患同时对设备有一定要求,具有局限性。
      专利公开号CN102002082.B中公开的方法为:黄芩原料粉碎过10~40目筛,料液比1:8~15,沸水投料回流提取2次,过滤,合并提取液。减压浓缩至比重为1.1~1.3,加入3~5倍量低碳醇,40~70℃加热提取0.5h,过滤,减压回收乙醇得浓缩液,浓缩液用酸调pH值1~2,再置50~70℃水浴保温1h,然后室温静置8h,抽滤得沉淀,用水洗至pH为6~7,再以50%醇溶液淋洗沉淀,干燥得黄芩苷。该工艺将原料粉碎虽可提高提取率但缺点在于:1、大生产中粉碎后的原料易造成过滤缓慢,增加生产周期;2、所用酸为稀盐酸或稀硫酸,使用中存在安全隐患同时对设备有一定要求,具有局限性;3、未指明低碳醇的浓度,影响实际操作。
      专利公开号CN1821257.A中公开的方法为:黄芩饮片粉碎,加10倍量水煎煮1h,过滤,药渣再加8倍量水煎煮1h,过滤,合并滤液在30℃以下向药液中加入体积比约为8%的浓度为10%的膨润土悬浮液,搅拌10分钟,静置或离心取上清液,40℃以下加盐酸调pH值为1.0左右,40℃保温1h,常温静置24h,沉淀物烘干,得到亮黄色黄芩苷粗品。该工艺将原料粉碎可提高提取率同时去除了碱溶和二次酸沉但缺点在于:1、大生产中粉碎后的原料易造成过滤缓慢,增加生产周期;2、药液酸沉前用膨润土作絮凝剂,但并未指明使用时pH值范围,因不同的pH值对膨润土悬浮液的吸附和沉降特性具有较大影响;3、所用酸为盐酸,使用中存在安全隐患同时对设备有一定要求,具有局限性;4、黄芩苷酸沉过程中需要一定的温度,上述方法中40℃保温1h,可能因保温温度低而造成提取率太低。
       专利公开号CN201510304151.0中公开一种方法为:黄芩药材切成0.5~1cm的小段,按料液比1:4~8加入80℃的浓度为50%-80%的低碳醇,回流提取3次,每次0.5-2h,合并提取液,凉至室温后过滤,滤液减压浓缩至黄芩药材量的5倍量,室温下用盐酸调pH值至1~2,80~85℃保温30~60min,弃去上清液,向沉淀中加入等体积浓度为90%~95%的低碳醇,50~80℃条件下保温30~60min,放置至室温后,去除醇液,沉淀于55~60℃低温干燥即得。该工艺的缺点在于:1、黄芩切成0.5~1cm的小段,在提取过程中不利于黄芩苷的溶出,提取率较低;2、提取和洗涤都使用低碳醇,大幅度提升生产成本和环境压力;3、滤液浓缩至黄芩药材量的5倍量,加入盐酸调pH值易耗费酸液并引发酸污染问题,同时盐酸对设备有一定要求,具有局限性。
       专利公开号CN105001285.A中公开的方法为:黄芩粉碎过40~60目筛,加入其重量1:4~8倍的乙醇超声提取25~40min,得到混合液,将混合液转移至回流提取装置进行回流提取,得到提取液;提取液浓缩后用柠檬酸调节PH值至2~3,过滤,干燥得黄芩苷粗品,再将粗品经硅胶柱层次,干燥后的固体物用甲醇溶解,再经重结晶,过滤、干燥即得高纯度黄芩苷。此工艺得到的黄芩苷纯度虽高但操作繁琐,步骤较多,用乙醇提取增加成本;柱层析过程缓慢增加生产周期,此外还用到甲醇易污染环境。
黄芩苷制备工艺存在以下不足
1、水提取酸沉淀法存在黄芩有效成分提取不完全、工艺步骤繁琐、提取出的杂质较多、生产周期长,产品损失大等缺点
2、成本较高,易引起污染:需要耗费大量有机溶剂;
3、在提取过程中引入絮凝剂但未考虑到絮凝剂的使用条件。
因此,研究改善黄芩苷制备方法具有重要意义。


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